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華肝IgY註冊商標



HP-IgY」「好益壯」免疫調節功能評估摘要



部補

份有限公司 委

財團法人 食品工業發展研究所主辦      中華民國九十七年








前言

      華肝基因股份有限公司(以下簡稱華肝基因公司)之「好益壯」之主要成分為免疫雞蛋蛋黃凍乾粉末(egg yolk immunoglobulin, IgY),並搭配桑黃及幾丁聚醣(chitosan)。有關免疫牛奶或免疫雞蛋的研究歷史相當久遠,如 Petersen & Campbell (1955)、Sherman & Freedman (1960)、或 Smith (1964)。免疫牛奶或免疫雞蛋多用於舒緩大腸桿菌(如Hilpert et al.,1987)、沙門氏菌(如 Yokoyama et al.,1998)、輪狀病毒(如Bartz et al.,1980; Kuroki et al.,1994)等所引起的腹瀉及縮短其腹瀉期間、或用於減輕花粉熱或風濕性關節炎等類的發炎性反應的症狀(如 Sherman & Freedman,1960; Struss,1964)。另外,調節血脂(膽固醇)亦是免疫牛奶或免疫雞蛋另一項受到矚目的保健功能(如 Golay et al.,1990; Sharpe et al.,1994)。
      目前對於免疫牛奶或免疫雞蛋的保健機制尚不清楚。早期,多認為免疫牛奶或免疫雞蛋是透過被動免疫發揮保健的功能。不過,Tacket 等人(1988) 在口服enterotoxigenic Escherichia coli 之挑戰實驗,發現受試者糞便中可測得細菌,且其血液中有抗 E.coli 抗體的生成;顯示免疫牛奶可促進某種程度的主動免疫。Greenblatt 等(1998)提出一機制假說,認為已知(1)病原菌可能在自體免疫疾病上扮演重要的角色,(2)腸胃發炎會加劇發炎症狀,因此藉由免疫牛奶或免疫雞蛋的被動免疫以減少或去除腸胃病原菌,將有助於降低或去除部分的自體免疫反應,而降低發炎反應,並有助於改善關節炎症狀。亦有認為免疫牛奶或免疫雞蛋中含有具有免疫調節作用的因子,例如 Ormrod & Miller(1991;1992)自免疫牛奶中分離得一低分子物,可抑制鹿角菜膠(carrageenin)誘發的水腫(oedema)程度。

      桑黃為一寄生於桑樹的多年生、木層孔菌屬真菌(詹,2008),近年來許多研究報告指出桑黃具有抗氧化(Chung et al.,1998)、抗突變(Sohn and Nam,2001)、抗腫瘤(Bae et al.,2005; Kim et al.,2003; Li et al., 2004)活性,以及保護肝臟的作用(Kim et al.,2004)。幾丁聚醣為幾丁質脫去部份或全部乙醯基之產物(Shahidi et al.,1999),由於號稱具有減重的功能,曾經相當流行。其對於脂質代謝的影響(Kanauchi et al.,1995)以及增強免疫(Deuchi et al,.1994; Minami et al.,1998; Razdam & Pettersson,1994)、抗腫瘤及抗菌(Shahidi et al.,1999)的活性是最受廣泛探討的。

                                      摘 要

• 本實驗依據衛生署「健康食品之免疫調節功能評估方法」
•  以管餵ova致敏BALB/c小鼠的方式,藉由小鼠體重、抗體、細胞激素、吞噬細胞活性、自然殺手細胞活性等測試與分析
• 評估華肝基因股份有限公司之「好益壯」之免疫調節功能
• 「好益壯」含有免疫雞蛋蛋黃凍乾粉末(Egg yolk immunoglobulin, IgY)、桑黃及幾丁聚醣
•   結果顯示,與水對照組相較,IgY可顯著地促進自然殺手細胞的毒殺活性,並可明顯地增加ova特異性Th1細胞激素IFN-γ的分泌、抑制非特異性及ova特異性Th2細胞激素的分泌(p<0.05)
•  餵食1倍劑量的「好益壯」明顯地促進脾臟T、B及ova特異性淋巴細胞的增生,升高ConA處理下及ova特異性IFN-γ的分泌,並抑制ova特異性IL-4及IL-5的分泌。
•  2倍劑量則可顯著地增進自然殺手細胞的毒殺活性、total IgG及ova特異性IgG的含量,並降低ova特異性IL-4及IL-5的分泌。


實驗流程


分析項目:

A.血清:總抗體及OVA特異性抗體量分析

B.血液吞噬細胞之吞噬作用試驗

C.腹腔細胞:自然殺手細胞毒殺試驗

D.脾臟細胞:

   淋巴細胞增生反應(MTT)(分別以ConA、LPS及ova刺激)

      Th1 cytokine: IL-2及IFN-γ分泌量

      Th2 cytokine: IL-4及IL-5分泌量

       脾臟免疫細胞之數量消長分析


實驗數據摘要

「好益壯」對BALB/c小鼠脾臟細胞ova特異性激素分泌量的影響

水對照組(n=10)

IgY-HP(n=10)

1X
(n=10)

2X
(n=10)

3X
(n=10)

IL-2 (pg/mL)Ova 100

50 + 12

40 + 13

56 + 21

48 + 13

40 + 13

IFN-γ (pg/mL)Ova 100

535 + 190

892 + 297*

751 + 191*

510 + 222

526 + 161

IL-4 (pg/mL)Ova 100

19 + 6

9 + 3*

6 + 3*

7 + 4*

9 + 4*

IL-5 (pg/mL)Ova 100

169 + 86

27 + 11*

69 + 48*

86 + 88*

104 + 136

1.結果以平均值+標準差(mean + SD)表示

2.* 表示與水對照組間有顯著差

3.Ova為過敏原

 


                    細胞動力素
(Cytokine)調節免疫
IFN-r

*IFN-r是由Th-1細胞與天然殺手細胞所分泌

*它可增加NK與T細胞,與巨噬細胞的殺傷活性,活化顆粒性白血球,所以可增加免疫抵抗力來保護身體,對抗外界的病原菌、病毒等侵入,具抗病毒與抗腫瘤作用

*同它可抑制Th-2細胞形成,下調B細胞生產抗體的功能

IgY與好益壯可明顯增加在小老鼠脾臟細胞ova特異性IFN-r的分泌(535±190 VS 892±297,535±190 VS 751±191,P<0.05),這代表可增加免疫抵抗力,具抗病毒與抗腫瘤作用。

IL-2
*IL-2是第1個被發現的細胞動力素

*T淋巴球分泌來對抗感染的主要工具,可區分異物與自身細胞

*IL-2是T細胞免疫記憶力的主力。在醫學上,它可用來治療癌症(黑色素癌與腎細胞症),也可用來治療慢性病毒感染與疫苗輔助。

*IgY與好益壯無明顯增加在小老鼠脾臟細胞ova特異性IL-2的分泌(50±12 VS 40±13,50±12 VS 56±21,P>0.05)

IL-4
*IL-4是由Th-2淋巴球所分泌

*會促進B細胞增殖與分化,分泌IgE與IL-5,

*會促進肥胖細胞增殖,造成過敏反應。(分佈在呼吸道和腸粘膜上)

*IgY與好益壯可明顯抑制在小老鼠脾臟細胞ova特異性IL-4的分泌(19±6 VS 9±3,19±6 VS 6±3,P<0.05),這代表可抑制過敏反應。

IL-5
*IL-5 由Th-2淋巴球或肥胖細胞分泌

*會促進B細胞增殖分化,誘導B細胞產化IgA抗體,IgA在腸道可抑制病原體與抗原粘在粘膜上,阻擋其進入體內。

*IL-5會抑制巨噬細胞,造成發炎與感染反應,不易控制。

*IL-5與過敏疾病(包含過敏性鼻炎與氣喘)有關,這些過敏病人的呼吸道與痰的嗜伊紅球大會增加

*IL-5可影響改變嗜伊紅球的行為與數目

*IL-5會增加嗜伊紅白血球的數目,加重過敏反應

*IgY與好益壯可明顯抑制在小老鼠脾臟細胞ova特異性IL-5分泌(169±86 VS 27±11,169±86 VS 27±11,P<0.05),這代表可抑制過敏反應


參考文獻

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  -健康食品之免疫調節功能評估方法,網址:  

  http://www.doh.gov.tw/ufile/doc/免疫調節880802.doc。

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